酸中毒时心脏克隆钾离子通道Kv1.4的动力学特性

目的:探讨心脏克隆钾离子通道Kv1.4的C型失活(Kv1.4△N)在非洲蟾蜍卵母细胞上表达后的动力学特性以及酸中毒时的改变. 方法:将Kv1.4△NcRNA(最大体积为50 nl)注入非洲爪蟾的卵母细胞内,于18℃孵育16 h以上.电极采用两步法拉制,微电极由1.5 mm口径的电极拉制.电极内充3M KCl,电阻0.5～1.0MΩ.采用双微电极电压钳制法(two electrode voltage clamp,TEV)在室温下(20～24℃)记录电流. 结果:与正常pH时相比,酸性环境下,Kv1.4△N的峰电流减小,在pH 7.4时通道在去极化至-40mv激活,而pH 6.8时为-30 mv激活;通道在pH 7.4时最大失活为0.384±0.072,而在pH 6.8时为0.197±0.013;在pH 6.8时通道复活减慢(P＜0.05). 结论:酸中毒导致通道电流减小,并且使通道失活加快和恢复减慢.