质谱技术鉴定体外蓝氏贾第鞭毛虫的细胞骨架蛋白

目的用质谱技术鉴定体外蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的细胞骨架蛋白。方法用改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体,提取虫体总蛋白,Bradford法测定蛋白质含量,样品经蛋白质2D-电泳后用硝酸银染色,扫描检测凝胶电泳图蛋白点的数量,获取蛋白质点匹配信息,然后挑选匹配性高的蛋白点,进行质谱(MALDI-TOF-MS)分析,鉴定其种类。结果虫体总蛋白质含量(4.8241±8)μg/ml。蛋白质二维电泳显示,蛋白点密集,约1 253个点,布满整块凝胶,蛋白表达量高,蛋白点颜色深且清晰、明亮。在胶图中随机选取80个匹配良好的蛋白点,经质谱分析,鉴别出5类46种蛋白质,其中细胞骨架蛋白6种(14个点),即α-贾第素、β-贾第素、γ-贾第素、δ-贾第素、中体素、鞭毛蛋白-1,代谢酶或相关蛋白18种(28个点),翻译转录蛋白5种(5个点),其他蛋白3种(3个点)、未知蛋白14种(14个点)。另有6个点未测出。结论质谱分析技术可用于体外蓝氏贾第鞭毛虫细胞骨架蛋白的鉴定。