人精子纤维鞘多态性蛋白CABYR的寡聚化作用

目的验证钙结合酪氨酸磷酸化调节蛋白(calcium-binding tyrosine phosphorylation-regulated protein,CABYR)不同异构体之间寡聚体的形成。方法人精子提取物进行非还原和还原条件下的SDS-PAGE、二维IEF/SDS-PAGE、对角线电泳、二维blue native/SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析。结果在人精子中丰度最高的CABYR亚型是相对分子质量86×103仅含CRA编码区表达序列,具有钙结合能力的异构体。同时也存在既含CRA又含CRB编码区表达序列的CABYR亚型。在非还原条件下,丰度最高的130×103二聚体是由仅含CRA表达序列的86×103异构体和既含CRA又含CRB表达序列的50×103异构体组成。(200~220)×103寡聚体是由86×103、50×103异构体,以及35×103(可能既含CRA又含CRB表达序列)的异构体和仅含CRA表达序列的30×103异构体组成。结论证实CABYR异构体可形成寡聚体,CABYR主要通过86×103和50×103异构体形成异质二聚体,与其他CABYR异构体结合进一步形成更大的寡聚体,参与了人精子纤维鞘超分子结构的装配和形成。