五步蛇毒纤溶组分FⅨcaⅠ的分离纯化和生物活性的测定

目的 从五步蛇(安徽产)毒分离纯化一种具有纤溶活性的组分FⅨcaⅠ,并研究其理化性质和生物活性.方法 应用DEAE-Sephadex A-50 阴离子交换层析、Sephadex G-75凝胶层析、Chelating Sepharose Fast Flow 金属离子螯合亲和层析和Sephadex G-50凝胶层析四步分离纯化目的 组分FⅨcaⅠ;纤维蛋白平板法和SDS-PAGE测定FⅨcaⅠ的生物活性;通过小鼠皮下注射不同剂量的FⅨcaⅠ,测量皮下出血斑的面积并求出最小出血剂量.结果 从五步蛇毒分离纯化的FⅨcaⅠ组分为单体蛋白,相对分子量 23 ku,等电点为 4.8.FⅨcaⅠ可降解纤维蛋白和纤维蛋白原,优先降解α 链,呈时效、量效关系.蛇毒纤溶酶FⅨcaⅠ最小出血剂量为54.9 μg,为非出血性蛇毒纤溶酶.结论 从五步蛇(安徽产)毒分离纯化的FⅨcaⅠ是一种分子量较小,比较稳定,纤溶活性强,可直接降解纤维蛋白且非出血性的新蛇毒纤溶酶.