阿拉伯糖异构酶的重组表达及性质研究

将来自大肠杆菌K-12的L-阿拉伯糖异构酶基因araA定向插入表达载体pET-32a(+)并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。经PCR、双酶切鉴定和序列分析,证实重组质粒pET32a-araA构建成功。重组菌经isopropylthio-β-D-galactoside(IPTG)诱导表达目的蛋白,主要以可溶形式存在。以重悬菌液为酶源,D-半乳糖为底物,在温度60℃、pH7.6时酶活最大,加入1 mmol/L Mn2+可使活力提高50%以上。