重组蛋白GST-OsCATB的表达特性研究

Liu Da-Li,LU Zhen-Qiang,Zhang Ge-Yan,YU Ting-Ting,Wang Xu

Bulletin of Botanical Research（2011）

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摘要

为了阐明水稻Catalase (CAT)的酶学功能,首先需要获得出足量的、活性的该酶蛋白.本研究克隆了水稻OsCATB基因(GenBank accession No.D26484),构建到原核表达载体pGEX-6p-3中形成重组蛋白,继而转入E.coli 菌株BL21中进行表达特性研究.结果表明,GST-OsCATB融合蛋白在E.coli中进行了过量表达,表达受到诱导剂浓度、诱导时间、诱导温度和诱导体系等多因素影响；通过谷胱甘肽Sepharose-4B亲合层析,纯化出足量、活性的融合蛋白GST-OsCATB,每克表达细胞(干重)中得率为51 mg GST-OsCATB.

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关键词

rice(Oryza sativa L.),Escherichia coli,purification,glutathione-S-transferase(GST) fusion protein,Catalase

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