黄芪多糖诱生脐血来源的树突状细胞体外介导抗白血病效应研究

目的:探讨经黄芪多糖诱生脐血来源的树突状细胞(DCs)体外介导的抗白血病细胞的细胞毒效应.方法:无菌条件下采集脐血.用淋巴细胞分离液分离获得脐血单个核细胞.分为两组,实验组:在含有浓度100mg/L黄芪多糖的10%胎牛血清的RPMI-1640完全培养液中培养;对照组:RPM1-1640完全培养液中培养.①在培养过程中用倒置光学显微镜和透射电镜观察细胞形态学变化;FCM技术检测培养第12天两组细胞的细胞免疫表型.②MTT比色法检测DCs对同种异体T细胞的增殖作用.③MTT比色法检测由DCs介导的对K562细胞的抑制作用.结果:①在培养的第72h后实验组细胞形态开始变化,随着培养时间的延长,树突状结构更加明显,第12天细胞呈典型的树突状细胞形态;对照组细胞生长缓慢,培养至第12天细胞呈梭形巨噬细胞形态.培养至lOd的实验组细胞透射电镜下呈典型的树突状细胞形态.培养12天实验组细胞高表达DCs特异性抗原CD1a、CD80、CD83和CD86,与对照组对应比较差异均有显著性(P＜0.01).②在混合淋巴细胞反应中,经黄芪多糖诱生的DCs具有明显激发同种异体T淋巴细胞增殖的能力,且随数量的增加而作用增强.③经黄芪多糖诱生的DCs负载肿瘤抗原后可诱导肿瘤特异性CTL产生抗白血病细胞毒效应,而对照单独T细胞对K562细胞的杀伤作用很弱.各对应效靶比实验组和对照组之间相比有显著的统计学意义(P＜0.05或0.01);各实验组间比较差异显著(P＜0.05或0.01);各对照组之间比较无统计学意义(P＞0.05).结论:①黄芪多糖可诱导脐血来源的单核细胞(即DCs前体细胞)定向分化为功能性(即成熟)DCs;②黄芪多糖诱生的DCs具有强烈激发同种异体T淋巴细胞增殖的能力.且随数量的增加而作用增强;③黄芪多糖诱生脐血来源的DCs可负载肿瘤抗原诱导特异性CTL的产生,发挥显著的抗白血病细胞毒效应.