两种方法分离新生大鼠颅骨成骨细胞纯度和活性的比较

目的 比较预消化组织块培养法与传统组织块培养法分离的新生大鼠颅骨成骨细胞纯度和活性的差异.方法 无菌条件下取新生大鼠颅骨骨片,分传统法和预消化法进行培养.预消化法先以0.25％胰蛋白酶/0.02％ EDTA预先消化,再按传统组织块培养法培养,观察细胞移出时间,采用Gomori钙钴法对原代细胞及纯化后细胞进行鉴定,对比两种方法获得的成骨细胞纯度.并测定第1、2代成骨细胞培养第10 d胞浆内碱性磷酸酶活性.结果 预消化法约第3d开始细胞自骨片移出,传统法约第5d开始细胞移出.两种方法分离的原代细胞碱性磷酸酶染色阳性率分别为( 87.83±2.34)％以及(82.88±3.14)％,差异有统计学意义(P＜0.05).纯化后成骨细胞染色阳性率分别为(90.71±3.15)％以及(90.17±2.97)％,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).两种方法获得的第1、2代成骨细胞培养第10d碱性磷酸酶活性比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 预消化组织块培养法细胞移出时间早,且所分离的原代细胞中成骨细胞纯度高.经纯化后成骨细胞纯度和活性与传统组织块培养法相似.