基于ELISA、TRFIA及AlphaScreen技术的血管内皮生长因子受体3拮抗剂筛选模型的构建及比较

WANG Ke,YANG Run-lin,XU Juan,ZHOU Bin,ZHU Lan,HUANG Biao

CURRENT IMMUNOLOLGY（2011）

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摘要

血管内皮生长因子受体3(VEGFR 3)为淋巴管特异标记物,与肿瘤淋巴管生成和转移具有明显的相关性,VEGFR-3胞内域的酪氨酸激酶(TK)直接参与了胞内信号转导途径,因此VEGFR-3 TK抑制剂可能成为抑制肿瘤淋巴道转移的有效药物.采用大肠杆菌成功表达人源VEGFR 3酪氨酸激酶(VEGFR-3 TK),并以其为靶点,分别构建了基于ELISA,TRFIA及AlphaScreen技术的高通量药物筛选模型,并从反应条件、方法学参数及相关性等方面对这三种模型进行了评估及比较.AlphaScreen采用均相反应系统,反应速度最快.TRFIA和AlphaScreen由于采用了稀土离子作为标记物,其灵敏度和检测范围大大高于ELISA,且自动化程度高.样品检测结果表明,三种方法的相关性较好,其中TRFIA和AlphaS-creen技术适用于大规模药物筛选,具有很好的应用前景.

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关键词

Vascular Endothelial Growth Factor

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