4Aβ15基因在毕赤氏酵母中的分泌表达及初步纯化
LIFE SCIENCE RESEARCH（2010）
摘要
以pQE4Aβ15为模板,PCR扩增4Aβ15基因,并克隆到pMD18T栽体中.以之进一步构建了酵母表达载体pPICZα4Aβ15通过电转化,重组质粒pPICZα4Aβ15被整合到毕赤氏酵母GS115基因组中.甲醇诱导GS115/pPICZα4Aβ15表达,得到重组蛋白.SDS-PAGE显示重组蛋白的分子质量为18 kD,而4Aβ15的分子质量理论值为8 kD,经Western blot和质谱分析证实重组蛋白为4Aβ15.毕赤氏酵母GS115/pPICZα4Aβ15工程菌发酵上清经60%饱和硫酸铵沉淀初步纯化,获得纯度为80%的重组4Aβ15.
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picha pastoris,gene
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