鸡IL-2的毕赤酵母表达和生物活性鉴定
Chinese Agricultural Science Bulletin（2010）
Abstract
IL-2是一种重要的免疫相关细胞因子,借助PCR去掉鸡IL-2基因片段(387bp)信号肽,连接到pPICZαA表达载体中,通过电转化转入Pichia酵母GS115菌株的感受态中,对筛选出来的阳性菌株以终浓度为1%的甲醇诱导表达,经SDS-PAGE及WesternBlot分析,结果表明酵母成功分泌表达了重组鸡IL-2,分子量为17.8kD。通过Ni-NTAHisBind柱层析,250mmol/L咪唑的洗脱液洗脱,得到纯度较高的重组鸡IL-2,淋巴细胞增殖试验证明,重组鸡IL-2具有明显的促进淋巴细胞增殖的生物活性,为进一步研究其免疫佐剂的作用提供了试验基础。
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Key words
chicken IL-2,secretory expression,Pichia pastoris,pPICZαA expression vector
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