邻近多位点基因突变的组合大引物PCR策略
China Biotechnology（2010）
摘要
报道了一种新的组合多位点突变策略,通过单管中三阶段聚合酶链式反应(PCR)得以实现.在第一阶段,PCR扩增出多位点突变大引物,然后在第二阶段延伸大引物,在第三阶段获得全长突变基因序列.基于退火温度与热循环参数的组合大引物反应的优化,三个阶段中退火温度差异小(低于10℃),成功扩增出多位点突变基因序列和比邻突变序列.是一种简单、高效的多位点突变方法.
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关键词
Multi-site mutagenesis Megaprimer PCR Genetic engineering Combinatorial three-stage PCR reaction Human interferon α
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