帕罗西汀对脂多糖损伤的海马神经干细胞的保护作用

目的 探讨帕罗西汀对脂多糖(LPS)损伤的海马神经干细胞(NSCs)活力及细胞凋亡的影响,并初步研究胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在其中的作用.方法 建立体外大鼠海马NSCs的LPS损伤细胞模型,分为对照组(sham组)、LPS组、LPS+帕罗西汀组(包括1、5、10和20μmoL/L 4个不同剂量组),作用72 h后,采用WST-8试剂检测细胞活性,蛋白质印迹(Western blot)检测磷酸化胞外信号调节激酶1/2(pERK1/2)的表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡情况.为了进一步明确ERK信号通路在这一过程中的作用,在干细胞培养基中添加ERK抑制剂U0126,并随机分为U0126组、U0126+ LPS组、U0126+ LPS+帕罗西汀组(包括1、5、10 μmol/L 3个不同剂量组),作用72 h后采用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 与sham组(吸光度值0.342±0.010)和LPS+帕罗西汀5 μmol/L组(吸光度值0.338±0.016)相比,LPS组(吸光度值0.306±0.016)细胞活力更低(F =23.019,P值均＜0.01),而LPS组与LPS+帕罗西汀1μmol/L组(吸光度值0.323±0.013)、LPS+帕罗西汀10 μmol/L组(吸光度值0.304±0.012)的细胞活力接近.Western blot结果显示,LPS组(0.749 ±0.144)的pERK1/2表达水平明显低于sham组(0.982 ±0.131)及LPS+帕罗西汀5 μmol/L组(1.092±0.113)(F=6.887,P值均＜0.05),而LPS组与LPS+帕罗西汀1μmol/L组(0.871±0.123)及LPS+帕罗西汀10 μmol/L组(0.766 ±0.209)的pERK1/2表达水平接近.流式细胞术检测凋亡的结果与细胞活力检测结果一致,与sham组[(13.40±2.87)％]比较,LPS组[(17.85±1.26)％]凋亡率更高,5 μmol/L帕罗西汀[(14.42±1.22)％]对LPS的促凋亡作用具有缓解效应(F=26.520,P＜0.05),而1μmol/L和10 μmol/L帕罗西汀则无此缓解效应；U0126促进NSCs的凋亡,而且可抑制5 μmol/L帕罗西汀对LPS损伤的保护效果.结论 适当浓度的帕罗西汀能抑制LPS导致的海马NSCs损伤,且这种作用可能是通过影响pERK1/2的表达实现.