猪α干扰素在家蚕中表达及其抗病毒活性测定
Current Biotechnology(2013)
摘要
本研究利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕中表达猪α干扰素。首先优化并合成猪α干扰素基因,将其克隆到杆状病毒转移载体pVL1393的多角体基因启动子下游,与线性化的Bm-BacPAK6DNA共转染至Bm-N细胞,在细胞内进行同源重组后,纯化得到重组病毒。Western杂交结果显示,在蚕血淋巴中可检测到猪α干扰素表达。用微量细胞病变抑制法在Vero/VSV GFP系统上进行干扰素活性测定,结果表明重组猪α干扰素有抗病毒活性,效价达到106U/mL以上,证明在家蚕幼虫体内成功表达了有活性的猪α干扰素。
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关键词
baculovirus,silkworm,antiviral activity,eukaryotic expression,porcine interferon
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