核因子-κB圈套寡核苷酸转染对小鼠成熟树突状细胞生物学特性的影响

Chinese Journal of Respiratory and Critical Care Medicine(2009)

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摘要
目的探讨核因子κB圈套寡核苷酸(NF-κBdecoyODN)转染对小鼠成熟树突状细胞(DCs)生物学特性的影响。方法体外诱导Balb/c小鼠骨髓细胞生成未成熟DCs(imDCs),经抗原OVA以及LPS孵育后成为OVA冲击的骨髓来源成熟DCs(mDCs),流式细胞仪检测DCs表面分子CD11c以及MHC-Ⅱ的表达予以鉴定;将NF-κBdecoyODN体外转染小鼠骨髓来源成熟DCs,同时设立阴性对照组(转染NF-κB"变异"ODN)以及未转染组,EMSA检测转染后NF-κB的活性变化;流式细胞仪检测各组DCs表面共刺激分子(CD40、CD80、CD86)的表达;混合淋巴细胞反应观察各组DCs对OVA致敏的T淋巴细胞增殖的影响。结果成功培养出骨髓来源成熟DCs;NF-κBdecoyODN转染DCs的NF-κB活性明显降低(P<0.05),DCs表面CD40、CD80共刺激分子的表达与阴性对照组、未转染组比较无明显改变(P>0.05),而CD86的表达与其他各组比较明显降低(P<0.05);在混合淋巴细胞反应中,NF-κBdecoyODN转染DCs对T细胞的增殖有抑制作用(P<0.05),而阴性对照组与未转染组的DCs具有强烈的激发T细胞增殖的能力(P<0.05)。结论NF-κBdecoyODN转染DCs可能通过CD86的表达降低显著抑制抗原特异性T细胞活化,该改良的DCs有可能用于哮喘的免疫治疗。
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关键词
Dendritic cells,Decoy oligodeoxynucleotides,Nuclear factor kappa B,Asthma,Immune tolerance
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