乙型肝炎病毒X蛋白对肝细胞L02增殖及GSK3β表达的影响

目的:通过研究乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)对人肝细胞株L02细胞增殖、细胞周期以及细胞中糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)表达的影响,探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关性原发性肝细胞癌(hepatoccellular carcinoma,HCC)的发生机制.方法:用HBx腺病毒(Ad-HBx)感染人肝细胞株L02细胞后,RT-PCR法榆测L02细胞中HBx和GSK3β mRNA表达情况;MTT法检测L02细胞的增殖率变化;FCM法检测细胞周期中各时相所占比例:蛋白质印迹法检测HBx、总GSK3β(total-GSK3β,t-GSK3β)、磷酸化GSK3β(phospho-GSK3β,p-GSK3β)、β-连环素(β-catenin)以及细胞用期蛋白(cyclin D1)等蛋白的表达水平.结果:Ad-HBx感染L02细胞后,HBx的mRNA和蛋白均出现表达,细胞增殖率随着时间的延长而增加;G1期细胞所占比例较对照组减少,S期和G2期细胞比例较对照组增加(P<0.05).感染Ad-HBx后,t-GSKSp在mRNA和蛋白水平上均无明显变化,而p-GSK3β、β-catenin以及cyclin D1蛋白的表达量增加(P<0.05).结论:HBx可能通过促进人肝细胞株L02细胞中GSKap的磷酸化,激活Wnt/13-catenin下游信号通路,从而促进细胞的增殖.