过氧化氢诱导条件下人黑素细胞树突变化及其胞内Ca~(2+)浓度变化的研究

目的:通过体外过氧化氢诱导模拟体内氧化压力条件下,联合观察人黑素细胞树突变化及其细胞内Ca2+浓度变化,初步说明黑素细胞经表皮丢失病理生理学基础。方法:采用常规分离培养人黑素细胞,分别用终浓度为0.1%和0.05%的H2O2作用于黑素细胞培养基中,于30、60、90、120和150 min后观察黑素细胞的树突变化,并通过目镜标尺测定树突变化率。另用Flu-3/AM染色,流式细胞术测定黑素细胞内钙离子荧光强度值。结果:使用不同浓度的H2O2诱导黑素细胞后树突显著回缩,0.1%H2O2对树突缩短作用强于0.05%H2O2;细胞内钙离子的荧光探针检测显示黑素细胞经过H2O2诱导后细胞内钙离子浓度升高,并且钙离子出现的峰值在诱导30 min时,早于黑素细胞树突缩短变化第1高峰60 min节点。结论:黑素细胞树突缩短可能与细胞内钙离子堆积,不能发生钙内流有关。