IL-2/IL-15刺激后脐血NK细胞穿孔蛋白表达及其与细胞毒活性的关系

本研究旨在探讨脐血NK细胞的穿孔蛋白表达水平以及IL-2、IL-15作用下穿孔蛋白表达与NK细胞细胞毒活性的关系.采用CD3阴选后CD56阳选两步免疫磁珠分选法纯化脐血NK细胞,流式细胞术测定NK细胞纯度,通过IL-2、IL-2+IL-15两种细胞因子培养体系培养3天,流式细胞术测定培养前后穿孔蛋白表达水平;LDH释放法检测培养前后脐血NK细胞对白血病细胞株K562的细胞毒活性(效靶比10:1).结果表明,纯化后CD3-CD56+细胞含量为(92.39±0.8)%.,以K562为靶细胞,新鲜纯化CB-NK的杀伤活性为(27.76±8.8)%,IL-2组杀伤活性为(61.9±9.1)%,IL-2 + IL-15组杀伤活性为(87.62±3.7)%,新鲜纯化CB-NK穿孔蛋白表达率为(67.21±6.14)%,IL-2组CB-NK细胞穿孔蛋白表达率(84.55±3.8)%,IL-2 + IL-15组CB-NK细胞穿孔蛋白表达率(87.22±2.2)%.穿孔蛋白表达率与NK细胞毒活性呈正相关(r=88.6,p< 0.05).IL-2组穿孔蛋白表达率与新鲜组差别有统计学意义,IL-2组与IL-2 + IL-15组穿孔蛋白表达率差别无统计学意义.结论:促进穿孔蛋白表达是IL-2提高脐血NK细胞细胞毒活性的途径之一.