类糖尿病环境对P19细胞分化为心肌细胞的影响

目的:探讨在类糖尿病环境下诱导P19细胞向心肌细胞分化过程中心肌转录因子GATA结合蛋白4(GATA bindingprotein 4,GATA4)和心肌特异标志物心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)的表达水平。方法:体外类糖尿病环境下,诱导P19细胞向心肌细胞分化,通过Real-time PCR和蛋白质印迹法分别检测其cTnT和GATA4在不同时间点的mRNA以及蛋白表达水平。结果:在分化过程中,类糖尿病组P19细胞分化形成的胚胎样小体较正常组增殖缓慢,形成的生长晕松散零乱。类糖尿病环境下GATA4 mRNA的表达量在分化第6、8、10天(0.05±0.06、0.11±0.04、0.45±0.12)均明显低于同时间点的对照组(1.00±0.04、0.44±0.06、0.78±0.20),cTnT mRNA的表达量(0.12±0.03、0.07±0.04、0.46±0.11)均明显低于同时间点的对照组(1.02±0.25、0.25±0.02、0.71±0.21)。蛋白质印迹法结果用积分光密度值量化数据,类糖尿病环境下分化第6、8、10天GATA4蛋白表达(0.40±0.06、0.25±0.03、0.92±0.13)均明显低于同时间点的对照组(0.69±0.09、0.75±0.08、1.05±0.07)。类糖尿病环境下分化第6、8天cTnT蛋白表达(0.39±0.08、0.37±0.05)均明显低于同时间点的对照组(0.79±0.05、0.54±0.07)。统计结果表明在分化第6、8天时,类糖尿病环境下GATA4和cTnT mRNA和蛋白的表达量与对照组相比,差异均有统计学意义。结论:类糖尿病环境培养降低了P19细胞向心肌细胞的分化。