小鼠白细胞介素-12基因在乳酸乳球菌中的表达

目的在乳酸乳球菌中表达小鼠白细胞介素-12基因。方法用NsiⅠ和EcoRⅠ双酶切pGEM-IL-12质粒后,与经同样酶切的含有乳链杆菌肽A(nisA)启动子的pSEC-E7质粒连接,从而构建成pSEC-IL-12质粒;经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养。用乳链杆菌肽(nisin)诱导白细胞介素-12表达,SDS-PAGE、Western blot鉴定表达产物;用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测IL-12的量。结果建立了白细胞介素-12乳酸菌基因表达系统。在nisin的诱导下,NZ9000能够产生并分泌白细胞介素-12约80ng/L。结论乳酸乳球菌能够表达一定数量的小鼠白细胞介素-12。