雌激素受体β对牙周膜细胞骨向分化能力影响的研究

目的研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast cell,HPLF)中雌激素受体β(estrogen receptor β,ERβ)后,对17β-雌二醇(E2)诱导的成骨能力的影响。方法设计并合成针对ERβ基因siRNA的寡核苷酸序列,插入载体形成重组载体。重组载体经测序鉴定后,以脂质体法转染至HPLF细胞中,蛋白质印迹法及RT-PCR法检测转染前后ERβ的表达情况。鉴定后用1×10-7mol/L的17β-E2干预经ERβsiRNA转染的HPLF细胞和未经ERβsiRNA转染的HPLF细胞,测定细胞的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和骨钙素(os-teocalcin,OCN)含量。结果测序鉴定重组质粒后,蛋白质印迹法及RT-PCR结果显示ERβsiRNA载体可特异地抑制HPLF细胞中ERβ的表达。经雌激素干预后,HPLF细胞ALP活性和OCN含量高于对照组(P<0.01),但ERβsiRNA载体稳定转染的HPLF细胞ALP活性和OCN含量与对照组相比没有显著性差异。结论雌激素可能通过ERβ亚基促进人牙周膜成纤维细胞的骨向分化能力。