幽门螺杆菌napA基因的克隆表达及免疫原性研究

ZHANG Ying-dan,YANG Xu,PENG Zheng-hua,HE Chun-yan,CHEN Yang,XU Wei-ming,LI Jian-feng

Journal of Yunnan University(Natural Sciences Edition)（2007）

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摘要

采用PCR方法扩增幽门螺杆菌napA基因片段并克隆至原核表达载体pET28a获得重组质粒pET28a-nap.将重组质粒转化E.coli BL21(DE3)表达菌后经IPTG诱导表达融合蛋白NAP,相对分子质量约为18ku,表达量约占菌体蛋白总量的40%.融合蛋白经纯化后获得纯度为95%以上的重组蛋白,Western blot分析其能与幽门螺杆菌抗血清特异性反应.与佐剂CpG ODN联合口服免疫小鼠后,可有效诱导免疫应答,产生高水平的IgG,与未加佐剂组相比具有显著性差异(t=7.095,P<0.01).以上结果说明融合蛋白NAP联合佐剂CpG ODN经口服免疫可有效诱导免疫应答.NAP可作为幽门螺杆菌口服疫苗候选抗原.

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关键词

Helicobacter pylori,nap A gene,neutropphil - activating protein

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