PACS-2在非酒精性脂肪性肝病动态变化及意义

目的 探讨PACS-2(phosphofurin acidic cluster sorting protein-2)及其所调控的葡糖调节蛋白78(glucose regulating protein,GRP78)和细胞凋亡标志蛋白Bax、Caspase-3在非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的表达变化及意义.方法 应用软脂酸诱导HepG2细胞脂肪变建立非酒精性脂肪性肝病体外模型,并按0、4、8、12、24 h时相点收获细胞,通过油红0(Oil red)染色检测细胞脂肪变程度.同时应用高脂饮食喂SD大鼠建立NAFLD 模型,并按时相点分为4、8、12、16、20周组,以普通饮食喂养为对照组.通过q-PCR及Western blot检测PACS-2及内质网应激标志蛋白GRP78和Bax、Caspase-3的表达.结果 软脂酸成功诱导HepG2细胞脂肪变性,应用高脂饮食喂养SD大鼠成功建立NAFLD大鼠模型.与对照组相比,PACS-2 mRNA相对表达量在HepG2细胞脂肪变模型早期(4、8h)下降,脂肪变模型晚期(12、24 h)升高；GRP78在8h组开始上升后,24 h组达到高峰(P＜0.01)；Bax、Caspase-3的表达均在12、24 h组显著上升(P＜0.01).在蛋白水平上,PACS-2、GRP78、Bax、Caspase-3的表达与mRNA水平表达基本一致(P＜0.01).NAFLD大鼠模型蛋白表达上,与对照组相比,PACS-2同样在早期(4、8周)下降,晚期(16、20周)上升(P ＜0.01)；GRP78在表达在4周上调后,20周达到高峰(P＜0.01).Bax、Caspase-3的表达均在晚期显著上升(P＜0.01).结论 PACS-2早期的低表达可能参与了NAFLD过程中的内质网应激,晚期升高可能与肝细胞凋亡所致的肝损伤密切相关.