人DNA甲基化转移酶3B1真核表达载体的构建和鉴定

Shuyuan JIANG,Guo Shao,Sheng ZHANG,Lihua HUANG,Xiangfeng GONG,Lishe ZHOU

Journal of Baotou Medical College（2010）

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摘要

目的:构建人DNA甲基化转移酶3B1(DNMT3B1)真核表达载体pCMV-DNMT3B1.方法:根据Genebank中人DNMT3B1 cDNA序列设计并合成特异性引物,提取HCT116细胞总RNA,利用PCR技术扩增出DNMT 3B1,并将扩增产物克隆到真核表达载体pCMV-2B中.结果:PCR扩增得到人DNMT3B1的cDNA片段大小为2.6 kb,重组子利用限制性内切酶进行酶切、PCR鉴定和DNA序列分析得到真核表达载体pCMV-DNMT3B1.结论:成功构建了人DNMT3B1真核表达载体,为进一步研究DNMT3B1提供了条件.

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关键词

Construction,identification,DNMT 3B7,Identification,construction,DNMT 3B1

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