利用荧光共振能量转移方法研究Snap23和Munc 18C在CHO细胞中的相互作用

目的研究突触小体相关蛋白(snaptosome associated protein of 23 KD,Snap23)与Munc 18C蛋白的相互作用。方法从人肌肉组织中钓取人Snap23基因并克隆入pEYFP-N1载体中,构建pEYFP-Snap23质粒,瞬时转染入CHO细胞后荧光显微镜观察并拍照,免疫蛋白印迹检测EYFP-Snap23蛋白的表达。共转染pEYFP-Snap23和PECFP-Munc 18c质粒,利用荧光共振能量转移的方法检测二者是否有相互作用,同时共转染pEYFP-Snap23和pECFP-N1作为对照组。结果成功构建pEYFP-Snap23载体,荧光共振能量转移实验证明Snap23与Munc 18C蛋白有相互作用。结论突触小体相关蛋白Snap23可能与Munc 18C相互作用。