联合输注Flt3-L和GM-CSF表达质粒体内诱导小鼠DC的研究

目的:探讨联合输注Fh3-L和GM-CSF真核表达质粒体内诱导小鼠DC的方法并检测其抗原提呈功能.方法:采用尾静脉注射法分别输注Flt3-L及GM-CSF质粒,15 d后收获小鼠脾脏;采用流式细胞术检测小鼠脾细胞CD11c、CD11b、B220、CD8a和NK1.1等表面标志以鉴定DC的比例及亚型;将体内诱导DC与HBsAg共孵育,然后刺激HBsAg预免疫小鼠的脾细胞并检测其分泌IFN-的水平.结果:联合输注Fh3.L和GM.CSF质粒小鼠的脾细胞达到4 ×108个细胞/脾脏、其中CD11c+细胞占20%以上,CD11c+细胞中CD11b+、CD11b-、B220+、CD8+、NK1.1+细胞的比例分别达17%、10%、26%、16%、7%左右;体内诱导DC负载HB-sAg后刺激HBsAg特异性淋巴细胞分泌IFN-γ的水平明显高于HBsAg单独刺激组.结论:采用小鼠尾静脉注射技术输注Flt3-L及CM-CSF质粒能够诱导CD11c+DC的产生并包含多种亚型,体内诱导DC具备有效的抗原提呈功能.