EphrinB2基因工程的骨髓间质干细胞对分化成血管内皮细胞的影响

目的观察研究ephrinB2基因转染对体外诱导环境大鼠骨髓间质干细胞(BMSCs)分化成血管内皮细胞的促进作用。方法采用密度梯度离心-贴壁培养法从Wistar大鼠骨髓中得到BMSCs。采用lenti-virus载体装载人ephrinB2基因转染大鼠BMSCs。采用流式细胞计数测定CD105、CD73、CD44、八因子(VWF)和血管内皮生长因子受体(KDR)等标志物在ephrinB2-BMSCs中的表达,并探讨其向成骨细胞及脂肪细胞体外分化的多向分化潜能。以2%FBS和50ng/ml血管内皮生长因子(VEGF)的培养条件,体外诱导ephrinB2-BMSCs向血管内皮细胞分化,并测定相应标志物的表达。结果未经诱导分化的ephrinB2-BMSCs表达CD105、CD73和CD44,不表达血管内皮细胞特异性标志物VWF和KDR。转染后的ephrinB2-BMSCs依然具有分化成脂肪细胞和成骨细胞的多向分化潜能。经诱导,ephrinB2-BMSCs表达VWF与KDR,并且其生成血管内皮细胞的比率及在Matrix基质上形成毛细血管样结构的比率均显著高于未转染ephrinB2的BMSCs。结论ephrinB2基因工程的BMSCs具有极高的向血管内皮细胞分化的潜能。这种基因工程细胞为建立冠心病患者的临床治疗新方法提供了有意义的资源。