天花粉蛋白突变体TCSKR173-174CG的构建、表达与纯化
Chinese Journal of Biologicals（2006）
摘要
目的 构建天花粉蛋白(TCS)突变体基因,并进行表达及纯化.方法 应用计算机预测TCS分子上可能的抗原决定簇,并进行定点突变.以栝楼基因组DNA为模板,经PCR扩增突变基因,与pRSET-A表达载体连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并对表达产物进行Ni-NTA层析纯化.结果 目的蛋白在大肠杆菌中获得高效可溶性表达,表达产物经纯化后,得到均一的TCS突变体蛋白.结论 已成功构建了TCS突变体基因,并获得高效表达.
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关键词
Trichosanthin,Prokaryotic expression,Site-directed mutation
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