EPHA2基因腺病毒感染树突状细胞诱导CTL对胶质瘤细胞的杀伤作用

目的:研究EPHA2基因修饰的树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)对U251胶质瘤细胞的杀伤效应,为胶质瘤的免疫治疗提供新的方法.方法:将重组EPHA2腺病毒rAd-EPHA2感染HLA-A2阳性的人外周血来源的DC,制备EPHA2基因修饰的DC疫苗,Western blotting和FACS方法检测感染后DC的EPHA表达.以DC疫苗体外刺激HLA-A2阳性的单个核细胞,酶联免疫斑点实验(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)和标准51Cr释放实验分别检测DC疫苗所诱导的CTL活性和对HLA-A2阳性的U251细胞的杀伤作用(另设rAd-Lac Z感染的DC组和PBS组作为对照).结果:成功制备了EPHA2基因修饰的DC疫苗,其可有效表达EPHA2蛋白.与感染rAd-LacZ的DC和PBS组相比,感染rAd-EPHA2的DC疫苗能有效激发CTL活性[(187 ±21)vs(12 ±4)、(18±5)个,P＜0.01]；所诱导的CTL对胶质瘤U251细胞有明显的杀伤效应[(45.7±6.8)％vs(7,1±4.5)％,P＜0.01],对自身淋巴细胞没有杀伤效应.结论:EPHA2基因修饰的DC疫苗能有效激发CTL活性,并对胶质瘤U251细胞有明显的杀伤活性.