反义核酸抑制PCR荧光检测乙型肝炎病毒S基因145位密码子变异株及其临床应用

目的建立一种反义核酸抑制PCR荧光检测方法,对临床标本乙型肝炎病毒(HBV)S基因G145R/A变异株进行检测。方法依据HBVS基因587和588位核苷酸变异设计PCR DNA扩增引物,并增加一条反义野生型引物。使其遇到野生型(不含G145R/A基因变异)核苷酸序列时不能扩增,PCR扩增被抑制,而遇到突变型核苷酸序列时能扩增,并以荧光显示G145R/A突变。结果使用突变型DNA引物进行PCR DNA扩增,对质粒DNA和HBV临床标本进行检测,检出G145R/A突变标本12份,对此12份标本采用ELISA法检测HBsAg和HBsAb,结果均为阳性。结论该方法简便、准确,可用于临床筛查G145R/A变异株检测。