流式细胞术检测不同试验条件对猪T淋巴细胞亚群的影响

通过不同方式处理猪外周血淋巴细胞,对不同保存时间的淋巴细胞进行流式细胞术检测,探讨其对T淋巴细胞亚群中CD3+、CD4+、CD8+亚群的影响。采用肝素钠、EDTA、枸橼酸钠3种抗凝剂抗凝猪外周静脉血,分别在第1、2、4、6、8、10天用流式细胞仪检测。结果表明,肝素钠抗凝,第1、2、4天内检测差异不显著(P>0.05),第6天检测CD4+、CD8+细胞显著减少(P<0.05),第8、10天极显著减少(P<0.01)。EDTA抗凝,第1、2、4天内检测差异不显著(P>0.05),第6天检测CD3+细胞显著减少(P<0.05),第8、10天极显著减少(P<0.01);枸橼酸钠抗凝,第1、2、4、6、8天内检测差异不显著(P>0.05),第10天检测CD3+、CD4+细胞极显著减少(P<0.01),CD8+细胞显著减少(P<0.05)。3种抗凝剂检测比较,处理后的第1、2、4、6天肝素钠抗凝管检测结果CD3+、CD4+、CD8+均高于EDTA和枸橼酸钠抗凝。本研究表明,流式细胞术检测猪外周血优选肝素钠抗凝,样本采集后4 d内检测完毕。