Raf激酶抑制蛋白增强卵巢癌细胞的化疗敏感性

目的:探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitor protein,RKIP)对卵巢癌SKOV-3细胞化疗敏感性的影响。方法:以脂质体法将含有人全长RKIP基因的真核表达质粒pcDNA3.1-ssRKIP转染入SKOV-3细胞中,Western blotting检测SKOV-3细胞中RKIP蛋白的表达。不同浓度顺铂作用转染后的SKOV-3细胞,MTS法观察RKIP基因转染对顺铂处理后SKOV-3细胞增殖的影响,流式细胞仪检测RKIP基因转染对顺铂诱导SKOV-3细胞凋亡及细胞周期的影响。结果:pcDNA3.1-ssRKIP转染的SKOV-3细胞RKIP表达明显升高。不同浓度顺铂处理细胞24、48、72h后,RKIP基因转染细胞增殖抑制率显著高于对照细胞(P<0.05)。用2.5μg/ml顺铂作用SKOV-3细胞24h后,RKIP转染细胞的凋亡率为(10.86±0.73)%,明显高于未转染细胞的(4.27±0.67)%和空质粒转染细胞的(4.02±0.43)%(P<0.01);在无顺铂作用情况下,RKIP转染细胞的凋亡率为(3.11±0.78)%,仍然高于未转染细胞的(1.51±0.13)%和转染空质粒细胞的(1.97±0.46)%(P<0.01)。细胞周期检测结果显示,RKIP转染细胞G0/G1期的比例下降,S期的比例增加,转染的SKOV-3细胞发生S期阻滞。结论:RKIP基因的转染可以增加卵巢癌SKOV-3细胞对化疗药物顺铂的敏感性。