WuTac血药浓度双抗体夹心定量ELISA检测方法的建立及其临床应用

目的 建立WuTac血药浓度双抗体夹心定量ELISA检测方法,并进行初步临床应用.方法 建立双抗体夹心ELISA法,定量检测血清中WuTac浓度,筛选最佳抗体包被浓度和酶标抗体稀释度,绘制标准曲线,并对该方法进行验证;应用该方法对36名健康志愿者单次注射不同剂量WuTac(0.05、0.1和0.2 mg/kg)前后14个时间点的临床血清标本进行检测.结果 最佳抗体包被浓度为0.2 μg/ml,最佳酶标抗体稀释度为1:15 000,标准曲线的线性相关系数r≥0.99,线性范围为3.9～125 ng/ml.高浓度WuTac标准品的变异系数小于15%;准确性为99.05%±5.00%(92.43%～110.02%);特异性良好.临床血清检测结果表明,WuTac在0.05～0.2 mg/kg范围内呈线性药代动力学特征.结论 已建立了WuTac血药浓度双抗体夹心定量ELISA检测方法,该方法的灵敏度、精密性和准确性均符合我国生物制品药代动力学研究的要求.