β-D-半乳糖苷酶动力学测定方法探讨及初步临床应用

目的建立β-D-半乳糖苷酶(GAL)自动化分析方法。方法用2-氯-4-硝基苯基-β-D-半乳糖苷(CNP-GAL)为底物,在pH值4.8柠檬酸-柠檬酸钠缓冲体系下,在405 nm处测定产物吸光度值的变化,得出GAL活性。用此方法检测了58名正常体检者及88例患者(包括急性肾功能衰竭15例、尿毒症32例、糖尿病肾病18例、高血压肾病23例)的GAL水平。结果本方法最适pH值为4.8,基质浓度为2.5 mmol/L。批内、批间平均变异系数(CV)分别为3.44%、5.17%。米氏常数(Km)为0.45 mmol/L。正常对照组GAL中位数(范围)为6.2(4.8~7.8)U/gCr,急性肾功能衰竭组为190(74.2~285.6)U/gCr,尿毒症组为39.6(8.9~161.0)U/gCr,糖尿病肾病组为11.3(5.5~67.0)U/gCr,高血压肾病组为16.1(4.1~137.5)U/gCr,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.001、P<0.05)。结论该法简便、快捷、精确,可用于自动化分析,并且留样方便,适宜临床常规应用。GAL可作为评价肾小管疾病及肾实质性疾病的一项指标。